[流觞曲水 列坐其次]列坐其次的次

发布时间:2017/7/19 15:52:00 编辑:goodook 手机版

范文一:非其次热传导方程的求解问题

有限区间上的热传导方程与分离变量法

??{0?x?l?0?t?T}u(x?t)使它满足我们将用分离变量法在矩形 上,求一个函数

热传导方程 ut?a2uxx?f(x?t)?0?x?l?0?t?T?

及初始条件 u?t?0??(x)?0?x?l?

和边界条件

u?x?0??1(t)?u?x?l??2(t)?0?t?T?

这里假定函数 f(x,t),?(x),?1(x),?2(x)都是连续的,且满足相容性条件:

?(0)??1(0)??(l)??2(0)

如同讨论波动方程的情形一样,这里泛定方程和定解条件都是线性的,所以混合问题可由以下定解问题

?ut?a2uxx?0??ut?a2uxx?f(x?t)0?x?l?t?00?x?l?t?0?(Ⅰ) (Ⅱ) ?u??00?x?l0?x?l?u?t?0??(x)??t?0 ?u??u??0?t?0?u??u??0t?0x?0x?lx?l??x?0

?ut?a2uxx?00?x?l?t?0(Ⅲ) ?0?x?l?u?t?0?0 ?u???(t)?u???(t)t?0 x?l2?x?01

叠加而成.因此,如果函数 u1,u2,和u3分别是定解问题(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)的解, 则原定解问题的解就可写成u ?u1?u2?u3?

对于定解问题(I)我们可用分离变量法求解,假定解的形式为

u(x?t)?X(x)T(t)?

代入(I)中的方程,得

T?(t)X??(x) ?????2 aT(t)X(x)

于是有 T?(t)?a2?T(t)?0? (2.13)

X??(x)??X(x)?0? (2.14)

X(x)应满足边界条件 先考虑方程(2.14),由(I)中的边界条件推知,

X(0)=0,X(l)?0 (2.15)

??0特征值问题(2.14),(2.15)才有非平凡解,此时特征值?取值为 只有

2 ?n???n????n?1?2?? ?l?与其相对应的特征函数为

n?x Xn(x)?Bnsin? l

再将(2.16)代入方程(2.13),得

a2n2?2

T?(t)?T(t)?0?2 l

它的解是

n2?2a2 ?tl2Tn(t)?Cne (2.18)

于是,所有函数 n2?2a2

?t n?xl2u(x?t)?X(x)T(t)?Aesin?n?1?

2?nnnn l

都是满足问题(I)中的方程及边界条件的非平凡解,其中 An?BnCn为任意常数 为了求出问题(I)的解,考虑级数

n2?2a2 ??2tn?xu(x?t)?Anelsinln?1满足初始条件

? n?xu(x?0)?Ansin??(x)? ln?1?(x)可在 [0?l]上展成以 这时只要

2ln?xAn??(x)sindxl0l

为系数的正弦Fourier级数即可.现在将(2.20)代入(2.19), 我们就得到混合问题(I)的形式解为

n2?2a2 ??t2ln??n?xl(2.21) u(x?t)?(?(?)sind?)esin?0lln?1l

u(x?t)确实是问题(I)的解. 下面我们证明由(2.21)定义的函数

?(0)??(l)?0定理5.3 设 ,则由级数(2.21)定义的函数就是混合??C1([0?l])且 ,

问题(I)的解.

M 证 先证明形式解(2.21)满足方程.由于从而有界, 于是存在正常数?( ,x)?C1([0?l])

使得? ,故对任意的 ,t0?0当 t?t0时有 An??M

n2?2a2n2?2a2 ?2t?t0n?x2ll ?Anesin??Mel

? )2t?(0而数项级数 收敛,因此,级数(2.21)在? 内内闭一致收敛且绝对收敛,所以函e

数 n?1

?内是连续的. u(x?t)在

t逐项微分级数(2.21),得级数 对

n2?2a2??n?a2l2tn?x(2.22) ut??An()esin? lln?1 而对x逐项微分级数(2.21)两次所得级数是

n2?2a2 (2.23) ??t???????uxx???An(

n?1n?2)ell2sinn?x?l

由于当 t?t0时,有 ??A?n?b?elsinn?x??M?n?b?el0

n????l ?l??l?

n2?2a2 ??t02l20?x?l?t?0e其中 收敛,所以级数(2.22)和(2.23)在区域 b?a或1.由于数项级数l

n?1

内闭一致收敛且绝对收敛. 从而级数(2.21) 是逐项可微的.由(2.22)和(2.23)立即得到 ut?a2uxx?0?

(x?t)满足定解条件.关于初始条件在定理的假设下 其次证明由(2.21)所确定的函数u

? n?x?(x)?Ansin?0?x?l ln?1

是一致且绝对收敛的.根据阿贝尔(Abel)判别法, 这个级数的项与单调下降且一致有界的序

?()2t的项的乘积所构成的级数对t是一致收敛的.所以级数(2.21)在区域 列0?x?l?t?0

上是一致收敛的.

u(x?0)??(x)?0?x?l?u(x?t)在区域于是函数 ?{0?x?l?0?t?T}上连续,即满足初始条件

x?0和 x?l处都是(x?t)在u(x?t)在 关于边界条件,由于函数u 故函数 上连续,

t?0都有u(0?t)?0?u(l?t)?0?连续的.因而对所有的 ,

定理证毕.

对于定解问题(II),如同波动方程的情形一样,也可通过齐次化原理, 把它化为齐次方程问题求解(可参见引理5.2).这里我们采用所谓特征函数法,它类似于常微分方程中的常数变易法.

设想定解问题(II)具有形如

? n?xu(x?t)?Tn(t)sin ln?1f(x?t)展成x的Fourier正弦级的解,其中T 是待定函数.为了确定T ,将自由项 n(t)n(t)

?n?xf(x?t)?f(t)sin?(2.25) nln?1 2ln?xf(t)?f(x?t)sindx? 其中n0ll

将(2.24)和(2.25)代入方程(2.10),得

2?? ?n?x?n?a?(t)?T(t)?f(t)sin?0??T?n?n??nll?t?t2n2?2a22n2?2a2????e????n?1??????

由此即得

2 ?n?a?T?n(t)???Tn(t)?fn(t)?n?1?2??(2.26) l??

再利用(II)中的初始条件 u?t?0?0,有

?n?xu(x?0)?Tn(0)sin?0?ln?1 ?

于是 (2.27) Tn(t)的初始条件应为 Tn(0)?0?n?1?2??

现在对定解问题(2.26),(2.27)求解,便得

n2?2a2

?(t??)t l2Tn(t)?efn(?)d?? 0

将 Tn(t)的表达式代入(2.24),即得

n2?2a2 ??(t??)tn?xl u(x?t)?(efn(?)d?)sin?0ln?1

t?0都有 (x?t)及它的一阶偏导数在?内连续,且对所有的 ,f(0?t)?f(l?t)?0定理5.4 假定函数f

(x?t)就是定解问题(II)的解.最后,对于定解问题(III)我们,则由(2.28)确定的函数u

只须令

u(x?t)?v(x?t)?U(x?t)?

其中则问题(III)化成如下混合问题 U(x?t)??1(t)?x

(?2(t)??1(t))?

?vt?a2vxx?f1(x?t), ? x?v????(0)???2(0)??1(0)?,?t?01 l? v?x?0?v?x?l?0???

其中 .f1(x?t)??Ut(x?t)而这个定解问题又可写成上面讨论过的定解问题(I)和(II)的叠加.

???

范文二:其次要培养孩子良好的行为习惯

其次要培养孩子良好的行为习惯。担任我们三(3)班的班主任后,我发现我们班还有大部分的同学由家长包办着生活中学习中的一切,比如整理书包,准备第二天上课用的学具。当然,在最初的时候,孩子忘带书本、忘带文具盒等都是难免的,对于这种情况,家长不要过分责怪,要帮助孩子增强自信,引导孩子认真细心准备好学习用品的习惯。一位有心的母亲是这样做的,她在孩子出门前会查一查书包,并对孩子说:“你的东西带全了吗?要是都全了,就和妈妈说声再见。”这个方法未必大家都实用,但多少可给我们一些启示。行为习惯的另一方面就是作业的按时完成,有时候老师没有布置书面作业,但一些实践性的活动作业和读一读、说一说、背一背的口头作业还是有的,要注意提醒孩子认真完成好。家长每天查看孩子作业是否认真,读、写、算、默、背是否过关,有问题及时补救。还要每天抽些时间听孩子说一说(今天学会了什么,学校、班级里发生了什么有趣的事),以便家、校配合,督促孩子更好学习;鼓励孩子听广播、看课外书和新闻节目等,为孩子准备几本有益的课外书籍并督促他每天定量阅读,养成读书的好习惯。 各位家长,让我们多给孩子一点关爱,作为老师,我会象对待自己的孩子一样,对待每一个学生,班主任对学生不仅要给予关心、爱护、鼓励、鞭策、指点、开导等,使师生之间关系融洽、自由、和睦,而且要对学生严格要求,严加管教。唯有做到宽严适度,严爱统一,方能有效地培养学生良好思想品质、行为习惯。我也衷心希望大家能支持我的工作。最后,祝愿我们全班每一位同学都象活泼的雏鹰展翅飞翔!祝愿第一位家长身体健康,万事如意!4、学生的一些良好习惯没有形成形成。个别学生,每次考试成绩都不太理想,实际上就是学习习惯差了一点,在校的表现如:早读到校后不能立即抓紧时间早读,上课听讲效果不好,课后作业没有保证真正弄明白。在家的表现如:周日等放假期间不能科学安排学习时间,学习观念不强。对此,我们老师会更进一步加强引导,希望家长能督促子女在家合理的安排自己的学习时间,同时检查要跟上,发现问题要及时解决。如果说因为工作忙等原因而疏忽了教育,一旦发生不良的后果,后悔就晚了。

我们班绝大多数女生都有着良好的学习习惯,能够及时保质保量地完成老师布置的任务,而有部分男生却不能很好地管住自己:作业马虎,而且在课堂上与课后的表现是判若两人,课堂上能踊跃发言,常能给老师和同学带来意外的惊喜。然而,他们在课外的表现却常常不尽人意,作业字迹潦草,有的甚至干脆不做,时常会惹周围的同学,他们身上的矛盾时时发生。老师时常找这些同学谈话,谈话过后的两三天学生的情况稍有好转,但不到一个星期的时间又死灰复燃,如此周而复始,学生已对老师的话感到厌烦,而教师也在寻找着另一种更为有效的途径。于是,老师寻求了家长的帮助,让家长也参与到孩子的作业中来,让家长平时检查孩子的作业,但有些家长却认为这是老师在向其推卸责任,故对老师要求检查并签名的任务置之不理,这让学生在第二天的作业很难和其他同学一齐交上来,只能撒谎或者模仿父母的笔迹,又养成了学生爱撒谎的坏习惯。习惯养成之后是

很难改正的,这些学生不仅没能将自身的坏习惯改掉,而且变本加厉,变得很难让人应付。这又是谁的过错呢?

各位家长朋友们:你们好!

总之一句话,就是“一切为了学生”。这是我们教育的一个根本出发点。我希望也相信,从这个出发点出发,我们的家长会一定能够达到预期的效果,取得成功!

作为家长,我们要能将孩子的成绩进行纵向比较和横向比较。所谓的纵向比较,就是将孩子现在同过去不同进期所取得的成绩相比较,是进步,还是退步,抑或是原地踏步着。进步是因为他在哪些方面有所改进,有所完善,分析得出后要加以鼓励,让其发扬光大,开始表扬的频率要高,渐弱之,至形成了习惯。踏步着,退步了是因为他不认真,还是方法不妥,分析得出后对症下药,拉起来后再扶上走一程,稍有进步,作为家长可以借助于老师的口吻,夸张一点表扬,树立起自信,让他自强不息。所谓横向比较,就是能将自己的小孩与同年级、同班级的其他孩子比较一下,找差距和不足,具有良好习惯的孩子,成绩一般都很优秀,而这一切,一方面归功于学校教育,另一主面也不可忽视,家庭氛围的熏陶,对于这些孩子的家长,我们不妨去讨教一番,我想再结合自己孩子的特点进行实践,定有收获。

另一方面,我们要能“不唯分数是问”。分数只能作为评介孩子的一个参照,90分与100分的孩子的数学能力究竟相差多少,不是仅分数就能说明的,我们得具体分析才是。孩子有失误,是纯粹的粗心,还是思考问题的方式有问题。是临考心理欠佳,还是??(略)

尊敬的各位家长,一切为了孩子,为了孩子的一切,为了一切孩子,是我们三小全体教师最大的心愿。但是每个孩子都是一个独一无二的世界,因此很难找到一个适合所有家庭、所有孩子的教育模式,以上所谈的一些建议,也仅供参考而以。不当之处还请批评指正。 各位家长朋友,欢迎您对我们今后的数学教学工作提出宝贵意见,希望我们能多交流,多探讨,期待着在我们的共同努力之.

俗话”数子千过,莫如夸子一长”,每个孩子都希望自己的能力得到了老师和家长肯定和赞赏。预其说“你不要这样做”还不如“你那样能够做更好”;与其让孩子在没完没了的批评中纠缠与做过的错事,还不如让适时的表扬给孩子的每次进步都鼓掌喝彩!

自信不足的孩子更是特别害怕出错,家长更应尽量让孩子感受到父母对他的欣赏。有进步!继续努力!没关系,我相信你一定能行!不要吝啬真心的表扬

在这一过程中,我们的家长要能耐住性子,多听少说,只要我们的话语能引发交谈话题,进行适当的点评反馈就够了

在生活中要多为孩子创设说数学的机会,让孩子说说自己的观点、看法与思路。和孩子交谈的形式不必过于正式,比如和孩子散步时,和孩子去公园时等等,这样交流的气氛要自然亲切得多。

三、态度、习惯准备

目前有许多家长往往只关注分数。其实分数和只是衡量学习情况的一个方面,要关注智力因素,也要关注非智力因素,这样才能使孩子全面发展,为以后的学习提供不竭的动力。

因此作为非智力因素的态度习惯就显得非常重要。好习惯使人受益终生。为什么有的学生会成为所谓的“差生”,其根本原因是态度、习惯问题。

1、培养深厚的学习兴趣:兴趣是最好的老师。保护孩子的好奇心,提供好书、鼓励阅读,教给基本的学习方法,采用具体、生动、形象或游戏的方式,提供展示学习效果的机会等等,激

发孩子的学习兴趣。

引导孩子爱学校,也是一种方法。对孩子讲述上学是一件很愉快事,唤起孩子求学的热情。开学当天,热情地陪伴孩子到校,欣赏校园景色,并告诉他这是学习新生活的开始,会十分有趣,只要肯动脑筋,付出努力,每天会有进步。我们学校在读书台旁,自古就是一个读书学习的好地方,环境是全省乃至全国最好的,随着扩建工程的实施,今后我们学校在这方面会更具特色和优势。这些都培养孩子学习兴趣的教育资源。

2、培养孩子主动积极、努力上进

让孩子养成时间意识,做作业不拖拉,在规定的时间内完成,特别要注意不要让孩子边做作业,边吃零食、看电视、玩玩具,这种习惯非常有害。家长要经常关注学习作业情况,同时要培养孩子的责任心。要让孩子懂得,学习是学生的最重要的事情,完成作业是应尽的义务。

3、培养孩子认真细心的习惯

如让孩子做业自己检查,看清题目,认真书写、计算等,这对以后的发展非常有益。

4、培养孩子专心听讲的习惯

小学的学习内容多、教授次数也较少,不会一遍遍地重复,因此需要孩子集中注意力,关注老师的要求。小学的每个班的人数有五十多个,教师在上课时精力有限,即使眼观六路,耳听八方,也会在某些时候有疏忽,因此孩子的是否专心听讲、思想集中的程度尤其重要。这是造成学习困难的重要原因。

5、培养自主自立的习惯

带领孩子实地熟悉上学必走的路线,告诉他行走、过马路、看红绿灯等基本安全知识。逐渐让孩子自己准备好所有学习用品,并教会他整理书包。(帮助孩子扫地)

6、培养交往合作的习惯

要鼓励孩子和同学交往,一起游戏,互相交流,取长补短。同时要注意教育孩子和同学和睦相处,不自私、不任性。

7、遵守规范的习惯

家长要配合学校讲解上学的道理及基本礼仪,教育孩子遵守学校的规章制度。如课堂常规方面有:不迟到、专心听讲,积极思考,发言响亮等。



范文三:帕金森易被忽略的“首先、其次和最后”

航天中心医院神经内科 2015-03-23 09:54:27 阅读(2713) 评论(0) 分享到

它是一种老人的病症,平均发病年龄为60岁左右,40岁以下起病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人群PD的患病率大约是1.7%。大部分帕金森病患者为散发病例,仅有不到10%的患者有家族史,在人老的时候就会有很多疾病发生,就因为这个原因帕金森(震颤麻痹)出现的时候更加不会让家属在意,因为帕金森(震颤麻痹)最初的疾病看上去都不怎么是病态,所以很容易被忽视,那么帕金森容易被忽略的症状都有哪些呢?

首先,面部无情,面部无情会给人一种不高兴的感觉,所以很多人都不会认识这个是一种病态,那么就是因为这个所以最容易被忽视,这种情况下,患者往往都是患有抑郁症的,因为长期在心里积压不开心的事情,所以导致患者越来越严重。

其次就是手抖,这种症状会让家人认为是刚搬过重的物品所以才会这样,所以就没有当作一回事,但是在后期,就会从一只手到一双手,这个时候症状应该明显了,所以希望家人带着患者去及时接受治疗。还有一个症状应该算是比较明显的症状了,那就是身体僵直的症状,在别人看来,患者的身体就会有走路向前冲的感觉,会被别人认为要摔倒,还会出现小碎步,不知道的人以为在跳舞,所以这个症状还是比较明显的,这个时候在不接受的治疗,恐怕治疗起来就是很费力的。

最后,抑郁症是作为帕金森的并发症出现的,帕金森病的一个“信号”,作为疾病的一部分,抑郁甚至比颤抖等“运动信号”来得更早。但大部分患者都忽视了它的重要性,这种内在情绪症状不仅会加重病情,严重影响患者的生活质量。

如果您想了解更多关于帕金森的知识,欢迎来参加全国帕金森病友会暨航天中心医院第三届帕友会。

时间:2015年3月29日

地点:航天中心医院科教楼报告厅

咨询电话:010-59971442、010-59971324

范文四:上兵伐谋,其次伐交,其次伐兵,其下攻城

《孙子兵法》云:“上兵伐谋,其次伐交,其次伐兵,其下攻城”。意思是说:上等的军事行动是用谋略挫败敌人,其次就是用外交战胜敌人,再次是用武力击败敌军,最下之策是攻打敌人的城池。其中“上兵伐谋”一语是指依靠谋略运用,包括政治、经济、文化、外交等手段的综合运作,不待对立双方矛盾激化即先期解决争端。上市公司有谁学到此精妙招数?来看看万科的“曲线拿地”模式,是否深得孙子兵法中“上兵伐谋”的精髓?

一、年报里的“资源整合”

万科2007年报里有这样一段关于“资源整合”的话——报告期内,公司继续加大资源整合力度,扩大合作对象范围,运用了多种合作方式。公司进一步受让浙江万科南都房地产有限公司的剩余20%股权;与上海恒大集团有限公司及上海吉鑫置业发展有限公司签署协议,获得上海浦东成山路、济阳路、五街坊、七街坊及中林等项目;与中国航空工业第一集团公司签署战略合作协议,共同组建综合性房地产开发公司开发房地产项目;通过公开拍卖方式获取了杭州钢铁集团公司下属之富春有限公司在浙江产权交易所转让的股权包;与新加坡嘉德置地集团达成了战略合作框架,住宅项目包含的商业部分与其展开合作。

二、王石话中的“兼并”手段

2007年报里的这段罗列,一般大众只是知其然、不知其所以然。那我们再听听万科董事长王石的解说,或许就明白了些许。2008-03-21《21世纪经济报道》刊登了一篇名为《王石香港澄清“拐点论”》的文章,王石如是称:“万科对小公司的土地没有兴趣,因为兼并讲究的是效率,而从效率上来讲,兼并小公司根本不划算。万科们希望兼并优秀的开发商。万科的策略是自己买地与兼并合作结合起来进行。万科和其它发展商的区别之一是:把兼并作为占有市场的手段,万科从2006年开始兼并,到去年兼并的项目已经分别占到了总项目的55%和41%”。

三、郁亮话中的“合作项目”

在3月26日万科召开的2007年度业绩说明会上,万科总裁郁亮亦曾有过如是一段话,值得我们好好回味:“万科可以在一段时间内,不依赖股权融资而保持每股收益的良好成长性,主要方法是增加合作项目比例,将主要资金用于开发合作方的存量土地,而不是自己购买项目资源。在这种模式下,公司可以实现非常高的周转率,并使净资产收益率在一段时间内呈上升趋势或维持高位,从而通过内生增长支撑每股收益的成长性”。

三、机构眼里的赞许之情

2008年03月28日《21世纪经济报道》在《万科再施趁火打劫 洽购中核置业攻取重庆》一文中称:“万科收购重庆中核宜华置业的消息开始在当地流传。资料显示,中核置业成立于2006年6月,注册资金5000万元,拥有位于重庆渝北农业园区一块面积300多亩的土地。中核置业在重庆有个在建项目——塞纳左岸,4月30日将开盘,建筑面积32万平方米。目前无从得知双方交易价格及具体细节,不过当地人士估计,万科出价不会太高,因为中小地产商在遭遇资金命门后被迫低价甩卖股权已不是第一桩。其他企业的财务困境,恰给万科提供了良好收购机遇。账面上170亿元现金,使万科攻城掠地有了充足弹药”。无论投资者还是分析师,对万科此模式均非常认同。国信证券分析师陈林认为,此策略可使其迅速获得土地和项目。这也是近期万科走强的原因。

据说有部分中小开发商通过地下钱庄等渠道融资,据说在一些二、三线城市,例如昆明,项目公司的民间拆借年利率到了30%,资金问题已经成为整个房地产行业集体思考的焦点话题。此时,万科的后劲发挥出来了,“上兵伐谋,其次伐交,其次伐兵,其下攻城”,单纯的拿地,只能算是“攻城”的层次,万科讲求的是最高的层次,所谓“上兵伐谋”是也。

正如近日银行陆续出台二套房贷优惠政策一般,金融股、地产股再度携手反击。周五大盘在这两大领涨板块的率领下一扫近日之郁闷,上证指数上涨168点,收于3580点。万科收于26.66元,上涨8.11%。

范文五:“太上立德,其次立功,其次立言”出自何处?

1)《左传·襄公·二十四年》(即纪元前549年)

大意如下:

晋国范宣子问来访的鲁国大夫叔孙豹:“古人有言曰,‘死而不朽’,何谓也?”接着他就说他家从舜以上世代高官厚禄,直到他现在在晋执政为正卿,可谓不朽吧?穆子曰:“以豹所闻,此之谓世禄,非不朽也。鲁有先大夫曰臧文仲,既没,其言立,其是之谓乎!豹闻之,‘太上有立德,其次有立功,其次有立言。’虽久不废,此之谓不朽。若夫保姓受氏,以守宗祊,世不绝祀,无国无之。禄之大者,不可谓不朽。”

2)《国语·晋语八》亦记此事。

时间:前549年(春秋-晋)

出处:《国语·晋语八》

原文:鲁襄公使叔孙穆子来聘,范宣子问焉,曰:“人有言曰‘死而不朽’,何谓也?”穆子未对。宣子曰:“昔匄之祖,自虞以上为陶唐氏,在夏为御龙氏,在商为豕韦氏,在周为唐、杜氏。周卑,晋继之,为范氏,其此之谓也?”对曰:“以豹所闻,此之谓世禄,非不朽也。鲁先大夫臧文仲,其身殁矣,其言立于后世,此之谓死而不朽。”

他说这话时,孔子三岁

范文六:内生菌的分离方法及其次级代谢产物研究

第25卷2011年第2期5月山东轻工业学院学报

JOURNALOFSHANDONGPOLYTECHNICUNIVERSITYVol.25May.No.22011

4280(2011)02-0023-04文章编号:1004-

内生菌的分离方法及其次级代谢产物研究

张鑫

孟国庆

刘新利

*

(山东轻工业学院山东省微生物工程重点实验室,山东济南250353)

摘要:植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群,分布于没有外在感染症状的健康植物组织内。随着研究领域的不断拓宽和研究方法的不断深入,越来越多的植物内生菌被分离出来,并从这些内生菌的代谢产物中发现以及植物内生菌次级代谢产物的了很多重要的生物活性物质。本文综述了不同种类的内生菌的分布和分离方法,生理作用及其在抗菌、抗虫、抗肿瘤等方面的应用研究进展。关键词:植物内生菌;次级代谢产物;生物活性物质;抗肿瘤;抗菌活性中图分类号:Q93

文献标识码:A

Researchadvancesinisolationmethodsandsecondarymetabolitesofendophytes

ZHANGXin,MENGGuo-qing,LIUXin-li*

(ShandongProvincialKeyLaboratoryofMicrobialEngineering,

ShandongPolytechnicUniversity,Jinan250303,China)

Abstract:Endophyteisaveryrichdiversityofmicrobialtaxa,itisdistributedinhealthyplanttissueswhichhavenoexternalsymptomsofinfection.Withtheconstantlyexpandingfieldofstudyandthemoreandmoreendophytesareisolated.Manyimportantcontinuousdeepeningofresearchingmethods,

bioactivesubstanceshavebeenfoundthroughthemetabolitesofendophytes.Theresearchadvancesinisolationmethodsofvariousendophytesaresummarizedinthisarticle.Theecologicalandphysiologicalroleandapplicationsintheantibacterial,insectresistance,antitumorofendophyticsecondarymetabolitesareintroducedsimultaneously.

Keywords:endophyte;secondarymetabolites;bioactivesubstance;anti-tumor;antimicrobialactivity

植物内生菌(Endophytes)是指那些在道。而目前,

其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物各种组织和器官内部或细胞间隙的真菌或细菌,被感染的宿主植物(至少是暂时)不表现出外在症状

[2]

植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群,分布于没有外在感染症状的健康植物组织内,并与宿主植物协同进化,其存在和作用长期以来一直为人们所忽视。最初内生菌(Endophyte)的概念是

[1]

人们针对病原菌(Pathogen)提出来的。1833年,

内生菌一般会产生一些在微生物-宿主关系中发挥作用的生物活性物质(如抗细菌、抗真菌、抗病毒物质等),这些物质在医药、农业、工业领域越来越受到人们的关注。本文主要综述了当前国内外植物内生菌的分离方法及其活性次级代谢产物的应用研究。

发现从小麦叶片中可长一种性质不明的锈状物,将它形象地称为Outgrows。经进一步研究,到1846年Leveille确定,这种Outgrows是真菌的一种结构,即现在所说的锈菌夏孢子,这是最早的植物内生菌报

收稿日期:2011-02-20

基金项目:山东省博士后创新项目专项资金(No.200903077)资助.

作者简介:张鑫(1985-),女,山东省莱州市人,硕士研究生,研究方向:应用微生物技术.通讯作者:刘新利,男,副教授,博士,从事微生物制药方向研究。E-mail:vip.lxl@163.com.

24

山东轻工业学院学报第25卷

1

1.1

植物内生菌的分布及分离

内生菌在植物中的分布

过程为选用紫外线和75%酒精作为表面消毒剂,经过多次消毒,加无菌水将材料研磨后,再将研磨液涂布。1.2.2

植物内生真菌的分离

大多数植物内生真菌属于子囊菌类(Ascomycetes),包括核菌纲(Pyrenomyetes)、盘菌纲(Discomyetes)和腔菌纲(Loculoascomyete)的许多种类以及它们的一些近源菌。内生真菌在药用植物中的研究较多,通过对一些药用植物的研究发现其内生真菌主要分布于镰刀菌属、交链孢属、青霉属、根霉属、芽枝霉属、毛壳菌属、曲霉菌属、盘多毛孢属、向基孢属、枝顶孢属、头孢霉属等,多样性十分丰富。现已在80多个属的几百种禾本科植物中发现

[8]

了内生真菌。

植物内普遍存在的内生真菌,其代谢产物大部

[9]

分具有抗肿瘤、抗菌活性。MinQ等从银杏中分离到能够产生酚类和黄酮类化合物的两种内生真

生物形态学方法分析结果表明这两株真菌都属菌,

于曲霉属,并且通过对ITS1-5.8SITS2区域的研究鉴定了其中一株是Aspergillusnidulans,另外一株为Aspergillusoryzae。巴西学者L.D.Sette等[10]用分子生物学手段对巴西环境和工业微生物保藏中心(CBMAI)的咖啡树内生丝状真菌进行了分类及抗rDNAD1/D2区序列以菌活性研究,基于ITS序列、

及种系发生分析,在种的水平上对37个菌株进行了鉴定,并且其中Aspergillusversicolor(CBMAI46)、Fusafiumoxysporum(CBMAI53),Glomerellasp.(CBMAI63)和Cladosporiumspp.(CBMAI64andCBMAI66)5种内生真菌能够抑制所有的供试菌株,S.aureusCBMAI485、包括S.choleraesuisCBMAI484、

绿脓杆菌CBMAI489、大肠杆菌STEC0157–933、大肠杆菌EIEC240-1、大肠杆菌ETEC5041-1和大肠杆菌EPEC0031-2。1.2.3内生放线菌的分离

除了研究较多的非弗兰克氏菌属的内生固氮放线菌以外,绝大多数内生放线菌为链霉菌属(Streptomyces),其次是小双孢菌属(Microbispora)、诺卡氏菌属(Nocardia)、小单孢菌属(Micromonospora)、链孢囊菌属(Streptosporangium)

[6]

和拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)也较为常见。UvidelloF.Castillo等从巴塔哥尼亚南部的假山毛榉(Nothofagusspp.)和其他植物中分离到若干株内生放线菌,并对其16SrDNA序列进行分析,发现这些放线菌不同于GenBank中报道的其他放线菌,这证明了植物体内存在大量的内生放线菌。沈月毛等

[11]

大部分植物体内都有内生菌存在,它们主要生

[3]

且种类极其丰富,主长在植物表皮下的组织中,

要包括真菌、细菌和放线菌等。大量研究表明,植物内生菌的种类和分布因植物实验部位及种类不同而

异。近年来,人们已从一些植物的茎、种子、胚珠、胚根、叶子及其它植物储藏器官内分离到大量内生细菌,从针叶类植物的树皮、枝叶内分离和鉴定出多种内生真菌,在多种草本植物、栽培植物、果树和蕨类

[4-5]

。本实验室植物中也发现了多种内生真菌类群也从苔藓类植物中分离到多株内生菌。

1.2植物内生菌的分离

分离内生菌时应选择不同生长时期的植物,对茎、叶等不同部位采用表面消毒剂,如升汞、乙其根、

H2O2、DMSO等表面消毒剂进行消毒,醇、次氯酸钠、

无菌水清洗并验证表面消毒彻底后再进行分菌,内生菌一般采用平板分离法。1.2.1植物内生细菌的分离

目前在各种农作物及果树等经济作物中发现的内生细菌已超过129种,分别属于54个属。这些内生细菌多为土壤微生物种类,其中假单胞菌属、芽孢杆菌属、肠杆菌属以及土壤杆菌属为常见的属。

RashmiTiwari等人[6]从药用植物圣罗勒的健康OS-10、OS-11叶子上分离出4种内生细菌OS-9、

和OS-12。他们首先将叶子用流水冲洗10min,随后于1%的次氯酸钠中浸泡10min,再用0.02mol/L、pH7.0的无菌磷酸钾缓冲液(PB)漂洗4次,每次洗后取100μL漂洗液转移到装有5mL肉汤培养基的离心管中,经过48h震荡培养(条件28℃),是200rpm,检测样品表面消毒是否彻底。曾庆桂等对珍贵药用蕨类植物蛇足石杉(Huperziaserrata)内生菌进行了研究,从中筛选到一株对小麦赤霉(Fusariumgraminearum)等植物病害真菌具有强拮抗作用的内生细菌。通过形态、培养特性的观察,生理生化实验以及16SrDNA序列分析等工作,初步鉴定该菌株属伯克霍尔德属(Burkholderia),与常用的生防菌洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderiacepacia)亲缘关系较远,将其命名为Burkholderiasp.H-6。

本实验室从苔藓中分离到一株具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌活性的苔藓内生细菌,这是首次报道来源于苔藓的内生细菌(待发表结果),分离

[7]

通过宏基因组方法寻找线索进行了植物内生

第2期张鑫,等:内生菌的分离方法及其次级代谢产物研究

25

—“宏放线菌的分离。近几年来,一种全新的技术

:直接提取特定环境中的总DNA,基因组技术”克隆从所获得的重组克隆子中到可培养的宿主细胞中,

筛选活性物质和相关基因,显示了其在挖掘和利用那些未可培养微生物的基因资源筛选新生物活性物质的潜力,同时也为分离植物内生菌及获得具有生物活性物质提供了有利途径。

感染内生真菌的高羊茅(Festucaarundinacea)叶片中的氮元素含量明显高于未感染内生真菌的高羊

茅。2.2.2

增强宿主植物抗逆境及病虫害等作用

内生菌能增强宿主植物抗逆性的特性是引起人们重视并使之成为新的研究热点的一个重要原因。关于内生菌作为生防因子的研究报道有很多,人们

[14]

由此开发出一些植物生防菌剂。如Chen等用来自棉花的内生细菌回接棉花,可以减轻人工接种感染的棉花枯萎症状。内生菌产生的抗生素类物质对病原菌有拮抗作用,这其中人们对内生菌产生的抗

4-二乙酞藤黄酚(PHL)和吩嗪羧酸(PCA)生素2,

的研究最为深入,它们对小麦全蚀病菌有较强的抑

[2]

制作用,对黄瓜枯萎病也有一定的生防作用。2.3

植物内生菌次级代谢产物的应用

内生菌次级代谢产物具有抗病毒、抗虫、抗菌、

2

2.1

植物内生菌次级代谢产物及其功能

植物内生菌次级代谢产物的多样性

植物内生菌具有丰富的生物多样性,其代谢产

物也种类繁多,主要有萜类、生物碱、皂苷类、芳香类、多肽类等,这些物质大多具有生物学活性,其中有很多对严重威胁人类健康的疾病有很好的疗效,另外内生菌在植物保护的开发与应用方面也具有重要作用。

表1

文献已报道的内生菌次级代谢产物

次级代谢产物名称

紫杉醇(Taxol)、长春碱(Vinblastine)、长春新碱

抗肿瘤活性的物质

(Vincristine)、喜树碱(Camptothesin)、羟基喜树碱、球毛壳素、鬼臼毒素(Podophyllotoxin)、鬼臼毒素类似物、Torreyanicacid、白灰制菌素A(Leucinostatina)、异香豆素、胞松素类化合物

抗菌活性物质杀虫活性物质

锡兰肉桂内生菌产生的挥环肽抗生素(Crytocandin)、Pestacin和Isopestacin发性物质、

Nodulisporicacids、香豆酮衍生物、萘、抗疟疾物质

抗肿瘤等活性,在医药、农药、育种等领域应用前景

广阔。2.3.1

抗肿瘤方面的应用

紫杉醇是一种以极低含量存在于各种紫杉属植物树皮和树叶中的萜类化合物,是临床上治疗肿瘤的良好药物。1993年美国科学家Strobel等从太平洋短叶红豆杉中分离到了一株能够产生抗肿瘤活性物质紫杉醇的菌株(Taxomycesandreanae),引起了人们对植物内生菌代谢产物应用的极大兴趣。至今已经从短叶紫杉(Taxusbrevifolia)、西藏红豆杉(T.wallichiana)、欧洲红豆杉(T.baccata)、南方红豆杉(T.mairei)等中分离出了多种能产生紫杉醇及其BFA)衍生物的内生菌。布雷菲德菌素(brefeldinA,

是一种大环内酯类紫杉醇衍生物,有明显的抗肿瘤

[15]

活性作用。方美娟等通过X线单晶衍射、薄层色谱扫描(TLC)和核磁共振等方法确认南方红豆杉、

2.2植物内生菌次级代谢产物对宿主的作用

内生菌长期生活在植物体内的特殊环境中并与宿主协同进化,植物内生菌与其植物宿主之间有复杂的关系。一方面植物体为其提供生长必需的能量和营养;另一方面,内生菌又可通过自身的代谢(如内生菌的固氮作用)、次级代谢产物或信号传导作用对植物体产生影响。2.2.1

促植物生长作用

内生菌能产生促植物生长的次级代谢产物,如

赤霉素以及细胞激动素等。张集慧植物生长素、

从兰科药用植物中分离出5种内生真菌,并从

这些真菌发酵液和菌丝体中提取出5种植物激素,等

赤霉素、吲哚乙酸、脱落酸、玉米素和玉米核苷,它们对兰花的生长发育有较好的促进作用。内生菌也能通过增强植物吸收氮、磷等营养元素、与病原菌竞争营养和空间,或直接产生拮抗物质抑制病原菌,从而在低水平氮源的土壤中内生真菌可增加宿主对氮元素的吸收,如间接促进植物生长。Lyons等报道

[13]

[12]

榧树和三尖杉(Cephalotaxusfortunei)内生菌的代谢

产物中含有BFA活性成分,并具有良好的抗肿瘤效果。

长春碱(vinblastine)是从夹竹桃科植物长春花(Catharanthusfoseus)中提取的生物碱。此类生物碱对治疗白血病有明显效果。现已发现从长春花组织中分离出的内生菌也能产生长春碱及其衍生物。张玲琪等通过薄层色谱扫描法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)证明长春花的内生真菌尖镰孢(Fusariumoxysporum)可以产生长春碱。杨显志等也从长春花中分离到一种链格孢菌(Alternariatenuissima)能够

[16]

合成长春碱。

2.3.2抗菌方面的应用

26

山东轻工业学院学报第25卷

王伟等从核桃的根、茎、叶、果中分离得到27株内生真菌,这些内生真菌能够产生多种具有抑菌活可以作为上述活性性和化感作用的次生代谢产物,

[17]

物质的筛选资源。人们还从内生菌中分离得到如Igarashi从杜鹃花内生链霉菌许多新的抗菌素,

[18]

发酵液中发现了新的抗菌素Fistupyrone;Pelaez等从一种刺柏Juniperuscommunis中分离到能够产生新的三萜糖苷类抗菌素的内生菌;Slxobel等从蛇藤和Grevilleapteridifolia植物内生链霉菌代谢产物中分离到新的抗菌素Munumbicins和Kakadumycins[19];以及Pullen从卫矛科植物内生链霉菌中得到新的chloropyrrol抗菌素等。2.3.3

其它方面的应用

香豆素(Coumarin)具有α-吡喃酮骨架,在植物体内广泛存在,除了可以调节植物生长外,还有抗抗菌、抗凝血等药理活性。内生菌中研究较多的癌、

是异香豆素(Isocoumarin)。从加拿大蓟(Cirsiumarvense)分离到1株可以产生异香豆素的无孢菌(Myceliasterile)。从昭和草中分离到一种地霉(Geotrichumsp.)可产生异香豆素类似物(Dihydroisocoumarin)[20]。

从藜科植物Echinopogumovatus分离的内生菌Neotyphodiumsp.可以产生N-甲酰黑麦草碱,对阿根廷象鼻虫和其它多种昆虫都具有很强的毒杀活性。泡林藤属植物Paullinapaullinioides的内生菌Muscodorvitigenus产生的萘类物质Naphthalene对小麦茎叶蜂(Cephuscinctus)的成虫有强烈的杀灭作用

[21]

植物内生菌产生的次级代谢物种类丰富、结构

新颖、作用机制多样,为寻找新的生物活性物质及天内然药物的开发和应用开辟新的途径。近几年来,生菌的研究已经受到医药学、生态学、微生物学、植动物学等领域科学家的广泛重视。新的物病理学、

植物内生菌及其次级代谢内生菌资源不断被发现,产物的研究必将蓬勃发展。参考文献:

[1]刘淑芬,韩宝坤.植物内生菌研究综述[J].邯郸农业高等专科

2000,17(2):15.学校学报,

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[14]ChenCE,BauskeM,MussonG,eta1.1995.Biologicalcontrolof

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植物内生菌还可以产生具有抗氧化作用的物

如杜仲内生真菌Chaetomellasp.产生的黄酮类质,

Ocoteacorymbosa植物类弯孢属内生真菌产生物质,

的苯并吡喃以及九里香正青霉属内生真菌产生的生物碱类物质Spiroquinazolinealkaloid等都具有明显的抗氧化的作用

[22]

3问题与展望

尽管植物内生菌具有多种生物学功能,并能产

生丰富的生物活性物质,但这一具有巨大潜力的资如何分离难培养内生源目前尚未得到较好的开发,菌是一个亟待研究的问题,植物内生菌与宿主之间的共生作用机理的研究也有待深化。由于内生菌次级代谢产物量一般较少,难以完成结构鉴定和活性测定的所有程序,因此,提高植物内生菌次级代谢物产量的研究还需要进行更加深入。

(下转第34页)

34

山东轻工业学院学报第25卷

满,柔软丰满,湿擦性较好。

考虑到清洁化生产及成本核算,我们以削匀后的二层蓝湿皮为原料皮进行二层绒面革的生产,采取如下工艺流程:蓝湿皮组批→回软(酸性酶软化)填充→染色、加脂→真空干燥→复鞣→水洗→中和、→磨绒→喷染→整理。

发革的关键;

(5)鞣后切实可行的后整理工艺路线是产品质量的保障。参考文献:

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[7]李彦春.黄牛磨砂沙发革的技术加工关键[J].中国皮革,

2000,29(11):18-19.

3总结

制作牛皮二层磨砂沙发革的工艺要点:(1)提高胚革的均质化,是生产高档优质沙发

革的前提和基础;

(2)复鞣前低温长时间软化很重要,可充分分散皮纤维,改善皮革手感;

(3)铬、聚合物复鞣剂、栲胶等结合复鞣填充,可提高坯革的物理机械性能并改善手感;

(4)染色、磨革的好坏是制造牛皮二层磨砂沙

(上接第26页)

[15]方美娟,王建锋,赵玉芬,等.用HPLC2MS2MS快速分析和鉴

定三尖杉植物内生真菌发酵液中的BrefeldinA[J].分析测试2005,24(1):21.学报,

[16]杨显志,张玲琪,郭波等.一株产长春新碱内生真菌的初步研

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[17]王伟,翟梅枝等.核桃内生菌的分离及代谢产物活性研究.西

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[22]TelesHL,SilvaGH,CastroGI.BenzopyransfromCurvularia

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范文七:黏细菌及其次级代谢物生物学性质的初步研究

摘要:目的研究分离到的黏细菌So ce shu-1及其次级代谢物的生物学特性。方法用烘干法和DNS法测定So ce shu-1利用纤维素的能力,用滤纸片法和溴化四唑蓝(MTT)法测定So ce shu-1利用纤维素次级代谢物抑制细菌和肿瘤细胞的效果。结果So ce shu-1能利用玉米秸秆和滤纸等纤维素,纤维素酶活性为12.30 UFPA/mL, 其次级代谢物有广谱抗菌活性,对 K562等肿瘤细胞有较好的抑制效果。结论So ce shu-1在能源利用方面,其次级代谢物在药物和食品保鲜方面具有良好的开发前景。

关键词:黏细菌;次生代谢物;生物活性

中图分类号:Q55文献标识码:A文章编号:1672-979X(2009)01-0027-04

Preliminary Study on Bioactivity of Myxobacterium So ce shu-1 and Its Secondary Metabolites

LI Yan-li1, ZHANG Yin-lei2, LIU Ying, MA Zhong-liang2*

(1. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China; 2. Shanghai Key Laboratory of Bioenergy Crops, Shanghai University, Shanghai 200444, China)

Abstract:Objective To study the bioactivity of myxobacterium So ce shu-1 and its secondary metabolites which can be separately obtained. Methods The oven-drying method and DNS method were used to determine the cellulose-utilizing capability of So ce shu-1. The antibacterial and antitumor effects of the secondary metabolites of So ce shu-1 were investigated by filter paper method and MTT method, respectively. Results So ce shu-1 could use the cellulose from cornstalk and filter paper, and its cellulase activity was 12.30 UFPA/mL. The secondary metabolites of So ce shu-1 had broad-spectrum antimicrobial activity and could effectively inhibit the growth of tumor cells, especially inhibiting K562 cell line. Conclusion So ce shu-1 can be used in energy development and its secondary metabolites have a bright development perspective in drug and food fresh-keeping.

Key words:myxobacterium; secondary metabolite; bioactivity

目前已从黏细菌中发现约600多种生物活性物质,约占微生物来源总数的5 %。黏细菌产生的生物活性物质种类繁多,结构新颖,作用层次多,作用机制多样等。这些次级代谢物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、免疫抑制、抗高血压、抗糖尿病、抗疟疾以及抗高胆固醇症等特性。抗生素产生菌比例高于放线菌,现已成为生物活性物质的新微生物来源[1,2],如epo系列的抗肿瘤药物,比传统抗肿瘤药物紫杉醇具有更多的优点[3]。某些黏细菌能利用纤维素,为将纤维素(农作物废弃物的主要成分)转化为生物燃料提供了新的选择。因此,黏细菌在能源综合利用及其次级代谢物在食品、医药工业的应用上都值得深入研究。我们现从这两方面对分离到的黏细菌进行了初步研究。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株和细胞黏细菌:So ce shu-1 按中国药科大学生命科学学院报道的方法分离[4]。测试菌株:大肠杆菌( Escherichia coli DH 5α)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、耐药金葡菌[Staphyloccocus aureus atcc 29213(耐药菌株)]、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、短小杆菌(Corynbacterium parυm)、产气杆菌(Aerobacter aerogenes)、百日咳杆菌(Bordetella pertussis)、伤寒杆菌(Salmonella typhi)、副乙伤寒杆菌(Salmonella paratyphi B)由本校微生物学教研室保存。肿瘤细胞株:HeLa、KB、K562以及SGC7901肿瘤细胞均购自上海生化细胞所。

1.1.2培养基发酵培养基(g/L):KNO3 1.0;K2HPO4?2H2O 1.0;MgSO4?7H2O 1.0;CaCl2 1.0;FeCl3?6H2O 0.2,酵母提取物10 g;加入放线菌酮(0.1 %),pH 7.2。固体培养基:在发酵培养基中按10 g/L加入琼脂。

1.2方法

1.2.1降解纤维素(1)将培养基分装于试管,新华一号滤纸剪成约0.5 cm×5 cm 的长条,部分露于培养基液面外。接种So ce shu-1至培养基中,以不接种者为空白对照。

(2)从平板上接种菌种至3 mL液体选择培养基上,37 ℃摇床培养1 d,成为种子菌液;取10 %种子菌液转入25 mL培养基中,37 ℃摇床培养至菌液A600为0.3;再加入2 000 g玉米秸秆粉,配制成半固体状,37 ℃培养1 d。培养后的混合物过滤取不溶物,烘干,称重计算秸秆降解率[5]。

1.2.2黏细菌纤维素酶活性――滤纸酶活性(FPA)的测定[6]以新华滤纸为底物,加入1.0 mL适当稀释的纤维素酶溶液,在特定pH值下,50 ℃反应1 h,用DNS(3,5-二硝基水杨酸)法测定反应生成的还原糖[7]。1个滤纸酶活性单位(1 UFPA)定义为上述条件下每1 h由底物产生1.0 mg还原糖所需的酶量,用U/mL表示。

1.2.3次级代谢物的分离及抑菌测定分离次级代谢物的方法按文献[4],抑菌实验用滤纸法[8]。向培养皿倾倒含菌培养基,铺置滤纸片,在滤纸片上滴加一定量的次级代谢物提取液,培养并测量形成的抑菌圈。以吸取蒸馏水的滤纸片为空白对照。

1.2.4次级代谢物的细胞毒实验用溴化四唑蓝(MTT)法[9]。

2结果

2.1测定黏细菌So ce shu-1对纤维素的水解

2.1.1So ce shu-1对滤纸的利用培养2周后,So ce shu-1使滤纸变薄,纤维素分解反应呈阳性,表明So ce shu-1可利用纤维素作为碳源。

2.1.2So ce shu-1对秸秆的利用So ce shu-1与秸秆共培养后,经烘干称重,玉米秸秆干重减少0.310 g, 降解率为15.50 %。

2.2纤维素酶活性的测定

培养液中纤维素酶的酶活性为 12.30 UFPA/mL。

2.3次级代谢物的抑菌作用

2.3.1抑菌谱的测定So ce shu-1次级代谢物抑制受试细菌的结果见表1。

由表1可见,黏细菌So ce shu-1次级代谢物对大部分受试细菌有明显的抑制作用,即具有广谱抗菌作用。

2.3.2抑制大肠杆菌的效果不同浓度的次级代谢物抑制大肠杆菌的结果见表2。

由表2可见,随So ce shu-1次级代谢物量的增加,抑菌圈直径增大,抑菌效果更加明显,在一定范围内呈浓度依赖性。

2.4次级代谢物对K562肿瘤细胞株的细胞毒作用

So ce shu-1次级代谢物对K562肿瘤细胞株作用24,48,72 h后,其对K562肿瘤细胞的抑制率见图1。

由图1可见,黏细菌So ce shu-1次级代谢物对K562肿瘤细胞株有很好的抑制作用。药物浓度小于0.121 mg/mL时,抑制率随药物浓度增加而迅速增加,增幅明显;药物浓度大于0.121 mg/mL时,抑制率随药物浓度增加呈增加趋势,但增幅趋于平缓;药物作用时间越长,抑制效果越明显,72 h的抑制效果明显优于48 h和24 h。肿瘤细胞24 h后的抑制效果见图2。

由图2可见,给药24 h后,细胞形态发生很大变化,细胞萎缩呈球状,黯淡无光泽,数量较稀疏,甚至出现细胞破裂溶出现象(A);对照组细胞饱满、有光泽(B)。

So ce shu-1次级代谢物作用于其他肿瘤细胞株以及与K562的比较见表3。

由表3可见,黏细菌的次级代谢物对多种肿瘤细胞均有抑制作用,抑制效果随作用时间的延长而增强,与对K562的抑制效果类似。表明,黏细菌So ce shu-1次级代谢物对不同的肿瘤细胞株也有抑制作用,有明显的时间依赖性。

3讨论

能源问题是目前全世界面临的重大课题,研究表明,黏细菌尤其是嗜纤维素的黏细菌能够利用纤维素,这为木质纤维素转化为能源提供了一大类新的微生物来源。我们初步研究的结果表明,分离所得的黏细菌确能降解玉米秸秆。此菌株降解秸秆的机制有待进一步研究,菌株降解条件也有待优化,以能更好的利用能源。

文献报道黏细菌次级代谢物对大多真菌有一定的抑制作用,对细菌特别是革兰阴性菌基本没有抑制作用[10,11],而本研究表明So ce shu-1次级代谢物对革兰阳性菌和阴性菌均有很好的抑制效果。我们发现,So ce shu-1次级代谢物对大肠杆菌的抑制效果不仅明显,而且可维持较长时间,出现抑菌圈6 d后仍未消失。尚无文献报道黏细菌代谢物抑制大肠杆菌的效果[12,13],提示该粗提物中可能存在新活性物质,有潜在的开发利用前景。

黏细菌So ce shu-1次级代谢物对K562肿瘤细胞有较好抑制效果,我们还用其他肿瘤细胞如HeLa、KB和SGC7901做了实验,结果表明次级代谢物对肿瘤细胞具有不同程度的抑制作用。此外,该菌的次级代谢物对MDA-MB-231和SMMC7721也有一定的抑制作用(数据未显示),表明它具有广谱抗肿瘤细胞活性;此菌的次级代谢物抑菌谱中,抑制菌多数为致病菌。从抑菌和抗肿瘤两个方面的研究表明,此菌的次级代谢物在药物和食品保鲜方面有很好的应用前景。

参考文献

[1]吴斌辉,李越中,胡玮. 纤维堆囊菌活性次级代谢产物的研究进展[J]. 微生物学通报,2002,29(2):75-78.

[2]Rachid S, Gerth K, Kochems I, et al. Deciphering regulatory mechanisms for secondary metabolite production in the myxobacterium Sorangium cellulosum So ce56[J]. Mol Microbiol. 2007,63(6): 1783-1796.

[3]Reichenbach H, H?le G. Discovery and development of the epothilones : a novel class of antineoplastic drugs[J]. J Antibiot, 2008, 9(1): 1-10.

[4]刘迎,马中良,王?. 海滨土壤黏细菌次级代谢产物的性质及产量调控的研究[J]. 微生物学通报,2006,33(3):42-46.

[5]杜甫佑,张晓昱,王宏勋. 木质纤维素的定量测定及降解规律的初步研究[J]. 生物技术,2004,14(5):46-48.

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[11] Rachid S, Sasse F, Beyer S, et al. Identification of StiR, the first regulator of secondary metabolite formation in the myxobacterium Cystobacter fuscus Cb f17.1[J]. J Biotechnol, 2006, 121(4): 429-441

[12] Sasse F, Bohlendorf B, Herrmann M, et al. Melithiazols, new beta-methoxyacrylate inhibitors of the respiratory chain isolated from myxobacteria. Producton, isolation, physico-chemical and biological properties[J]. J Antibiot, 1999, 52(8): 721-729.

[13] Gerth K, Bedorf N, Hofle G, et al. Discovery and development of the epothilones: a novel class of antineoplastic drugs. [J]. Drugs R D, 2008, 9(1): 1-10.



范文八:有关理想的名言名句 人往往不知退而求其次

1、最理想的境地既不可达,人往往不知退而求其次。

2、志气太大,理想过多,事实迎不上头来,结果自然是失望烦闷;志气太小,因循苟且,麻木消沉,结果就必至于堕落。

3、只有同这个世界结合起来,我们的理想才能结出果实;脱离这个世界,理想就不结果实。

4、在这一人航海的人生浩瀚大海中,理想是罗盘针,热情是疾风。

5、在理想的最美好的世界中一切都是为最美好的目的而设。

6、一个人专心于本身的时候,他充其量也只能成为一个美丽,小巧的包裹而已。

7、一个人有了崇高的伟大的理想,还一定要有高尚的情操。没有高尚的情操,再崇高,再伟大的理想也是不能达到的。

8、一个人向着目标迈进的时候,应当笔直地朝前望的。

9、一个人是否有足够的“志气”,直接决定事情的成败。我们只要不放弃自己的愿望,不改变自己的初衷,在自己认为最适合的事情上面去求发展,就自然会有成功的一天。

10、一个精神生活很充实的人,一定是一个很有理想的人,一定是一个很高尚的人,一定是一个只做物质的主人而不做物质的奴隶的人。

11、信念不是到处去寻找顾客的新产品推销员,它永远也不会主动地去敲你的大门。

12、小事小节斤斤计较而淡漠大事、大节的人是不会有什么作为的。我从来不把安逸和快乐看作是生活目的本身,这种伦理基础,我叫它猪栏的理想。

13、无论是人类还是民族,如果没有崇高的理想,就不能生存。

14、我要把人生变成科学的梦,然后再把梦变成现实。

15、我对于事业的抱负和理想,是以“真”为开始,“善”为历程,“美”为最终目标的。

16、天下为公会有期。

17、生活好比旅行,理想是旅行的路线,失去了路线,只好停止前进。

18、如果一个人不知道他要驶向哪个码头,那么任何风都不会是顺风。

19、如果能追随理想而生活,本着真正自由的精神,勇往直前的毅力,诚实不自欺的思想而行,则定能至于至善至美的境地。

20、人有了物质才能生存;人有了理想才谈得上生活。你要了解生存与生活的不同吗?动物生存,而人则生活。

21、人类的幸福和欢乐在于奋斗,而最有价值的是为理想而奋斗。

22、你们朝着伟大的目标前进的理想,将是使你们勇敢地走进生活中去的鼓舞力量。

23、目标愈高,志向就愈可贵。

24、没有理想,即没有某种美好的愿望,也就永远不会有美好的现实。

范文九:有关理想的名言名句 人往往不知退而求其次

1、最理想的境地既不可达,人往往不知退而求其次。

2、志气太大,理想过多,事实迎不上头来,结果自然是失望烦闷;志气太小,因循苟且,麻木消沉,结果就必至于堕落。

3、只有同这个世界结合起来,我们的理想才能结出果实;脱离这个世界,理想就不结果实。

4、在这一人航海的人生浩瀚大海中,理想是罗盘针,热情是疾风。

5、在理想的最美好的世界中一切都是为最美好的目的而设。

6、一个人专心于本身的时候,他充其量也只能成为一个美丽,小巧的包裹而已。

7、一个人有了崇高的伟大的理想,还一定要有高尚的情操。没有高尚的情操,再崇高,再伟大的理想也是不能达到的。

8、一个人向着目标迈进的时候,应当笔直地朝前望的。

9、一个人是否有足够的“志气”,直接决定事情的成败。我们只要不放弃自己的愿望,不改变自己的初衷,在自己认为最适合的事情上面去求发展,就自然会有成功的一天。

10、一个精神生活很充实的人,一定是一个很有理想的人,一定是一个很高尚的人,一定是一个只做物质的主人而不做物质的奴隶的人。

11、信念不是到处去寻找顾客的新产品推销员,它永远也不会主动地去敲你的大门。

12、小事小节斤斤计较而淡漠大事、大节的人是不会有什么作为的。我从来不把安逸和快乐看作是生活目的本身,这种伦理基础,我叫它猪栏的理想。

感谢欣赏本文,更多名言警句请关注:描述理想的句子? 关于人生理想格言

范文十:杉树育苗中对水涝及其次生灾害的应对措施

摘 要:杉树苗木培育是一项系统工程,需要落实每一项技术措施,特别是预防水涝及其次生灾害,这是杉树苗木培育重中之重的工作。本文先简单介绍杉树的生物学特性;对水涝及其次生灾害进行解读;就杉树育苗中预防水涝及次生灾害技术措施,从适当早播、高垄栽培、及时排水、适时追肥、药物防治5个方面进行探讨。

关键词:杉树;育苗;防涝;措施

中图分类号:S791.27 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20150501085

引 言

杉树怕旱喜湿,成年期对水分要求很多,在山坳谷底靠近水源的地方生长更迅速。而杉树育苗时,幼苗对水分要求不多,不仅怕雨水渍涝灾害,还要防止由此引发的次生灾害对杉树苗形成损害。因此,需要采取适当早播、高垄、及时排水、适时追肥等措施进行防御,确保杉树育苗安全顺利。

1 杉树生物学特性

杉树属于松科。常绿乔木。高可达30m,胸径能够长到3m,树形整齐,树干挺拔,树皮呈现鳞状,褐色。杉树在海拔4000m以下地区都可见生长,有较强耐寒性。杉树种类很多,大多喜温、喜湿、怕风、怕旱,在土层深厚的谷底生长较好。木质纹理通直,不翘不裂,广泛用于建筑、桥梁、造船、电杆、家具等行业,其根、皮、叶、果可以入药,杉树全身都是宝,被称为“万能之木”。杉树虽然喜湿怕旱,但早期育苗期间,对水分要求还是比较严格,水涝灾害及其次生灾害是杉木新育苗死亡的首要原因。我国南方特别是广东、广西、福建等省区,每年的春夏两季特别是6、7月间,降水量大且降水时间集中,雨后往往伴随着高温高湿天气,在这种气候条件下,杉树育苗必须采取防涝措施,否则不但容易造成杉树苗的根腐烂,直接导致杉树苗死亡,而且如不对此进行积极的灾后补救措施,那么由雨水渍涝灾害而产生的次生灾害同样也会导致杉木幼苗死亡或者生长缓慢。

2 杉树育苗受水涝及次生灾害影响

南方杉树育苗大多选择春天,杉树幼苗期时,恰逢雨季。杉树喜湿喜温,特别是生长后期,对水分要求很多,土壤湿度合适,其生长迅速。但杉树幼苗期,对外部环境因素非常敏感,特别是雨水过多时,杉树苗根部如果被雨水浸泡,很容易造成腐烂,树叶枯黄逐渐枯萎,最后造成大面积树苗的死亡,根据笔者多年的观察记录,苗期在3月以内的杉木新育苗,如被水涝完全浸泡时间达12~18h,即会绝收。由于雨水较多,土层透气性较差,杉树苗呼吸不畅,即使幼苗不死亡,也会造成弱苗现象。如果遇上高温天气,土壤温度较高,各种病菌会趁虚而入,导致树苗多种病害的发生。雨水过大,也会形成土壤的板结,不利于杉树幼苗吸收养分,杉树生长缓慢,形成杉树的先天不足。

3 杉树育苗防水涝及次生灾害技术措施

杉树幼苗对雨水太过敏感,为确保杉树育苗安全生长,需要加大防水涝力度。杉树育苗防水涝需要多管齐下,从不同环节入手。这样才能有效防御雨水的侵袭,防止雨水次生灾害的发生。

3.1 适当早播

杉树以有性繁殖为主,可以采用容器播种育苗,也可以利用苗床播种育苗。在南方地区,还有不少地方采用苗床育苗的方法。杉树播种时间一般在春季2~3月(受气候因素影响,桂北地区甚至推迟到4月中旬),播种后要30d左右才能发芽出土,杉树幼苗生长比较缓慢。南方雨季来得早,在幼苗期很容易遭遇雨水的侵袭。因此,可以适当提前播种,如果能够在2月前播种,到3月出土,由于出苗早,杉树幼苗扎根深,雨季来临时,苗木生长进入旺盛期,抗性增强了,抵御水涝的能力自然就提升。

为促使杉树种子提早出苗,需要对杉树种子进行浸种催芽处理。种子要先进行水洗和消毒处理。将种子放入0.5%高锰酸钾溶液内浸泡2h,然后捞出用清水冲洗,或者将种子倒入0.15%福尔马林溶液中浸种15min,滤除药液,再封闭杀菌1h。为提升杉树种子发芽率,还可以用40℃左右温水浸种12~24h,然后取出放在25℃环境下催芽,2~4d后便可以进行播种。

3.2 高垄栽培

杉树育苗前要先选择适合的地块作为育苗苗圃。一般情况下,要选择土层深厚、土质肥沃、排灌便利的沙质地块作为苗圃。最好是新垦荒地,土壤病菌稀少,有利于杉树幼苗健康生长。不管是山坳还是谷底,要注意有良好的排灌条件。特别是排水系统要完备。如果排水系统不健全,在整地时,要注意挖好排水沟渠。建议采用坡地因地制宜造水平苗床的方式育苗,从根本上防止积水现象的发生。

苗圃要深翻土壤,晒垡15~20d,清除杂物。要起高垄堆成苗床,最好是南北方向,或者是按照地势筑床。一般苗床高30cm,宽为100cm。播种时,以横条播种,条沟宽为3~4cm,深度大约1cm,行距为20cm。要将种子均匀播撒在沟内,用黄心土或火烧土覆盖,上面再用稻草、麦秸等覆盖,要保持苗床的湿润,特别要防止雨水的冲刷。

高垄种植可以有效防止雨水的漫灌,而且苗圃四周还有完备的排水系统,即使遇到连阴雨,雨水也不会浸泡杉树幼苗的根部,这样可以减少雨水对苗木的侵害。高垄种植还能够为苗木生长提供良好土壤墒情,土壤不被雨水渍涝,当然不会板结,透气性好,杉树幼苗根系能够及时吸收养分,对杉树苗木防病害也有积极帮助。

3.3 及时排水

南方地区雨水大,雨季来得早,杉树幼苗抵御雨水侵袭能力非常薄弱,如果其根部被雨水浸泡,很容易造成腐烂。大雨到来之前,需要做好相关检查。查看排水沟渠是不是通畅,雨量大时,会不会形成杉树苗木的渍涝。苗床的周围排水系统也要做好检查疏通,要确保整个排水系统能够及时将雨水排泄出去。

及时排水防止杉树幼苗不被水涝,还要防止排水不畅形成的次生灾害。有些苗圃虽然能够保证杉树苗木不被水淹,但畦垄沟内有积水,也会对杉树苗木根系造成侵害。如果积水时间过长,会导致畦垄土壤板结,土壤透气性差,影响杉树苗木正常生长。如果气温过高,这种高温高湿环境也很容易形成病害。因此,要注意彻底及时排水,防止水涝次生灾害的发生。   3.4 提高抗性

适时施肥:要施足基肥,结合整地起高垄,一次性施入腐熟有机肥3000~5000kg、饼肥200kg、碳酸氢铵50kg/667m2,要将有机肥和无机肥混合施用。如条件允许,一次按100~125kg/667m2的量施复合肥效果最佳。苗期追肥,根据苗木长势以及苗木不同生长期,制定不同追肥计划。雨季来临,杉树苗木长势决定抗御水涝和次生灾害的能力。杉树苗木进入生长旺盛后期,追肥要多施用磷钾肥,不施用氮肥,促进苗木木质化,提升抗性。

及时给药:苗床消毒,可以在苗床上撒施硫酸亚铁10~15kg/667m2,能够有效抑制和消灭病菌,苗圃地最好能1年1换,轮休期起码达到1年。苗期病虫害防治要及时,杉树幼苗在受到水涝灾害后很容易患上猝倒病,可以采用1%~2%硫酸亚铁溶液喷施,用量为150kg/667m2,每隔7d喷施1次,连续喷施4~7次。当杉木苗生长到12cm高时,要用3%赤霉素喷施2次,可以大大提升杉木苗生长速度,提升其抗性。

3.5 灾后措施

杉树防止水涝侵害难保万无一失,一旦出现水涝灾害,或者诱发了水涝次生灾害,要采取一系列措施加以补救。

疏通渠道排水,要将苗木田块的内外排水渠道进行全面疏通,尽快将积水排出。有条件搭设遮雨棚的,要在大雨前做好搭建。

次生灾害发生后的田间追肥要及时,受灾杉树苗木很容易出现大面积黄叶、枯萎现象,为帮助苗木尽快缓苗,要及时追肥,要提升氮肥施用量,提升苗木长势,增强抗性。

次生灾害发生后,杉树苗木很容易患上杉木赤枯病、杉木细菌性叶枯病,要及时给药,杀灭病菌,恢复苗木长势。可以用兽用土霉素500倍液,或者70%代森锰锌500倍液,或者70%百菌清600倍液喷施,防治杉木细菌性叶枯病;可以用1%波尔多液,或者用50%可湿性退菌特500倍液,防治杉木赤枯病。

4 结 语

南方杉树苗木培育期间防水涝及次生灾害,这是杉树苗木管理最关键技术。为确保杉树苗木健康生长,要制定系统防水涝侵害整治预案。苗圃地块的选择、播种时机的把握、高垄栽培、及时疏通排水渠道、适时追施肥料、采用药物防治病害等,要把防治工作做到细化。

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[4] 普文贵,楚永兴.秃杉苗木培育技术研究[J].绿色科技,2014(25).

作者简介:龙欣(1979-),融安县林业局,助理工程师,从事多年种苗培育管理,研究方向:致力于杉木、马尾松的培育。